電泳是在空間均勻電場的影響下分散顆粒相對于流體的運(yùn)動
發(fā)布日期:2020-02-24 瀏覽次數(shù):2832
電泳是在空間均勻電場的影響下分散顆粒相對于流體的運(yùn)動。帶正電粒子(陽離子)的電泳有時稱為電透法,而帶負(fù)電粒子(陰離子)的電泳有時稱為陰離子電泳。 該電動現(xiàn)象是由俄羅斯的教授彼得·伊萬諾維奇·斯特拉霍夫和費(fèi)迪南德弗雷德里克·羅伊斯在觀察發(fā)現(xiàn),他注意到,恒定電場的應(yīng)用程序引起的粘土分散在顆粒的水遷移。這是由于粒子表面和周圍流體之間存在帶電界面而引起的。它是化學(xué)中用于通過大小,電荷或結(jié)合親和力分離分子的分析技術(shù)的基礎(chǔ)。
電泳用于實(shí)驗室根據(jù)大小分離大分子。該技術(shù)應(yīng)用負(fù)電荷,使蛋白質(zhì)向正電荷移動。電泳儀用于DNA和RNA分析。
電泳在具有靜態(tài)pH的緩沖溶液中進(jìn)行。電場施加到包含正端和負(fù)端的電泳室。如果被電泳物質(zhì)的pH值低于周圍緩沖液,則會向正極遷移。如果該物質(zhì)的pH值高于周圍的緩沖液,則會向負(fù)極遷移。物質(zhì)以兩種不同的速率遷移:粒徑和總體電荷。遷移物質(zhì)的pH值與周圍緩沖液的pH值之間的差異越大,物質(zhì)越能通過凝膠遷移。大分子由于摩擦力而“卡住”,并且遷移速度小于可以通過凝膠導(dǎo)電并且阻力很小的較小顆粒。
蛋白質(zhì)如何通過電泳分析?
將氨基酸樣品和緩沖溶液置于凝膠上。然后電壓施加到凝膠上。如果氨基酸的等電點(diǎn)低于緩沖液的pH值,它將變成帶負(fù)電的。氨基酸會移向帶相反電荷的電極,它們會根據(jù)分子量分離。氨基酸的位置可以通過染色來檢測。然后測量氨基酸行進(jìn)的距離并在標(biāo)準(zhǔn)中比較。