介紹Bio-rad電泳儀及電泳槽操作規(guī)程
發(fā)布日期:2018-05-29 瀏覽次數(shù):1538
介紹Bio-rad電泳儀及電泳槽操作規(guī)程
一.意圖
為規(guī)范Bio-rad電泳儀及電泳槽的根本操作、保護(hù)養(yǎng)護(hù)、反常處理程序,避免人為操作失誤,保證Bio-rad電泳儀及電泳槽正常工作,特制定本程序。
二.適用范圍
本程序適用于Bio-rad電泳儀及電泳槽。
三.職責(zé)
1. 本程序的實(shí)施者為Bio-rad電泳儀及電泳槽操作者,各實(shí)驗(yàn)室擔(dān)任人對(duì)本程序的實(shí)施狀況進(jìn)行監(jiān)督。
2. 平時(shí)運(yùn)行及保護(hù)、定時(shí)保護(hù)、定時(shí)點(diǎn)檢及養(yǎng)護(hù)由Bio-rad電泳儀及電泳槽操作者擔(dān)任。
四.內(nèi)容
1.灌膠
a、取出灌膠模具,翻開封底盤至*敞開的狀況,松開兩側(cè)螺絲,向外側(cè)翻開夾子。
b、取長(zhǎng)方形和帶凹槽的長(zhǎng)玻板各一塊,從內(nèi)到外順次按帶凹槽玻板及長(zhǎng)方形玻板的順序排列,構(gòu)成gel sandwich。留意準(zhǔn)確排列以防漏膠。
c、短玻板朝外將sandwich放入模具中,檢查sandwich的底是不是緊靠底面。旋緊螺絲。將封底盤鎖至密閉狀況。
d、將模具放在桌面上預(yù)備灌膠。 e、根據(jù)需要制造一定濃度的膠。
1、別離膠的灌制:用加樣槍漸漸將膠參加sandwich中,留意不要有氣泡。其上加0.1%SDS封頂.
2、濃縮膠的灌制:待別離膠凝后棄去SDS,開端灌濃縮膠,zui終悄悄刺進(jìn)梳子。
f、待膠聚合后,拔出梳子,用電泳緩沖液清潔加樣槽,去掉未聚合的膠。 g、模具放入電泳槽中。
2.電泳
a、加適當(dāng)?shù)碾娪揪彌_液 b、預(yù)備樣品,加樣。
c、蓋上電泳槽的蓋子,留意赤色對(duì)正極,黑色對(duì)負(fù)極。翻開電源,開端電泳。初始電壓100V, 15分鐘后改為120v。
d、直至指示劑距前沿1cm處完畢電泳,拔掉電源,當(dāng)心取出膠,根據(jù)需要進(jìn)行染色或轉(zhuǎn)膜,回收電泳緩沖液(可重復(fù)使用3次)。
五.留意事項(xiàng):
a、每次用完后,當(dāng)即清潔電泳槽,灌膠模具,玻璃板(先用自來水洗潔凈,再用蒸餾水沖一遍后放在架子上曬干)。
b、扣緊或翻開灌膠模具時(shí)要用力均勻,以免壓壞玻璃板。 c、蓋上電泳槽的蓋子時(shí),必須留意正負(fù)極不要接反。